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PDA培养基的配制方法是什么?

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2025-07-22 01:28:24

PDA培养基的配制方法是什么?】PDA(Potato Dextrose Agar)培养基是一种广泛用于真菌和酵母培养的基础培养基,因其营养丰富、操作简便而被广泛应用于微生物学实验中。以下是PDA培养基的配制方法总结。

一、PDA培养基的主要成分及作用

成分 含量(g/L) 作用说明
马铃薯浸汁 200 提供碳源、氮源及微量元素
葡萄糖 20 提供碳源,促进菌体生长
琼脂 15–20 凝固剂,使培养基呈固态
1000 溶解各成分,调节浓度

> 注:不同实验室可能根据实际需要对成分比例进行微调,如葡萄糖可适当增减,琼脂也可根据需求调整。

二、配制步骤

1. 准备材料

- 新鲜马铃薯若干(约200g)

- 葡萄糖(20g)

- 琼脂(15–20g)

- 蒸馏水(1000mL)

- 烧杯、量筒、天平、pH计、高压灭菌锅等

2. 制备马铃薯浸汁

- 将马铃薯去皮、洗净、切成小块。

- 加入适量蒸馏水煮沸后,继续煮10–15分钟,直至马铃薯变软。

- 过滤取汁,补足至1000mL。

3. 混合其他成分

- 在马铃薯浸汁中加入葡萄糖和琼脂,搅拌均匀。

- 加热至沸腾,确保琼脂完全溶解。

4. 调整pH值

- 使用pH计测量培养基的pH值,一般控制在5.6–6.0之间。

- 若pH偏高,可用稀盐酸或柠檬酸调节;若偏低,可用氢氧化钠调节。

5. 分装与灭菌

- 将培养基分装到三角瓶或试管中,每瓶约200–300mL。

- 用牛皮纸包好,放入高压灭菌锅中,在121℃下灭菌15–20分钟。

6. 冷却与保存

- 灭菌后取出,待冷却至50–60℃时倒入无菌培养皿中,静置凝固。

- 储存于4℃冰箱中,使用前检查是否污染。

三、注意事项

- 马铃薯浸汁应现做现用,避免长时间存放导致变质。

- 灭菌过程中注意防止水分蒸发,影响最终体积。

- 配制完成后应尽快使用,避免细菌污染。

通过以上步骤,可以成功配制出适合真菌和酵母培养的PDA培养基。此方法适用于大多数常规微生物实验,具有较高的实用性和稳定性。

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