【PDA培养基的配制方法是什么?】PDA(Potato Dextrose Agar)培养基是一种广泛用于真菌和酵母培养的基础培养基,因其营养丰富、操作简便而被广泛应用于微生物学实验中。以下是PDA培养基的配制方法总结。
一、PDA培养基的主要成分及作用
成分 | 含量(g/L) | 作用说明 |
马铃薯浸汁 | 200 | 提供碳源、氮源及微量元素 |
葡萄糖 | 20 | 提供碳源,促进菌体生长 |
琼脂 | 15–20 | 凝固剂,使培养基呈固态 |
水 | 1000 | 溶解各成分,调节浓度 |
> 注:不同实验室可能根据实际需要对成分比例进行微调,如葡萄糖可适当增减,琼脂也可根据需求调整。
二、配制步骤
1. 准备材料
- 新鲜马铃薯若干(约200g)
- 葡萄糖(20g)
- 琼脂(15–20g)
- 蒸馏水(1000mL)
- 烧杯、量筒、天平、pH计、高压灭菌锅等
2. 制备马铃薯浸汁
- 将马铃薯去皮、洗净、切成小块。
- 加入适量蒸馏水煮沸后,继续煮10–15分钟,直至马铃薯变软。
- 过滤取汁,补足至1000mL。
3. 混合其他成分
- 在马铃薯浸汁中加入葡萄糖和琼脂,搅拌均匀。
- 加热至沸腾,确保琼脂完全溶解。
4. 调整pH值
- 使用pH计测量培养基的pH值,一般控制在5.6–6.0之间。
- 若pH偏高,可用稀盐酸或柠檬酸调节;若偏低,可用氢氧化钠调节。
5. 分装与灭菌
- 将培养基分装到三角瓶或试管中,每瓶约200–300mL。
- 用牛皮纸包好,放入高压灭菌锅中,在121℃下灭菌15–20分钟。
6. 冷却与保存
- 灭菌后取出,待冷却至50–60℃时倒入无菌培养皿中,静置凝固。
- 储存于4℃冰箱中,使用前检查是否污染。
三、注意事项
- 马铃薯浸汁应现做现用,避免长时间存放导致变质。
- 灭菌过程中注意防止水分蒸发,影响最终体积。
- 配制完成后应尽快使用,避免细菌污染。
通过以上步骤,可以成功配制出适合真菌和酵母培养的PDA培养基。此方法适用于大多数常规微生物实验,具有较高的实用性和稳定性。